SPR生物传感器高通量检测多种食源性 致病菌的研究

SPR生物传感器高通量检测多种食源性 致病菌的研究
目的  建立一种基于表面等离子共振技术 (Surface Plasmon Resonance technology, SPR)原理的生物传感器方法, 实现11种常见致病菌的高通量检测。方法  用表面自组装技术(self-assembled monolayer, SAM)在金膜表面引入羧基, 然后通过氨-羧基反应将5’端标记有氨基的探针固定在芯片表面, 经多重PCR扩增出的产物变性、杂交、生物素-亲和素系统信号放大等步骤完成目的片段的检测。对所建立的多重PCR-SPR检测方法的灵敏性、特异性等技术指标进行评价。结果  本研究建立的多重PCR-SPR检测方法具有良好的灵敏性, 该芯片检测11种常见致病菌的灵敏性均达到103~104 cfu/mL, 能满足现有检测要求。通过对实验室保存的14株标准菌株和沙门氏菌等90份样品分离株进行检测, 结果显示该检测方法具有较好的特异性, 无交叉反应。结论  本研究建立的多重PCR-SPR 检测系统具有良好的灵敏性和特异性, 完全适用于11种致病菌的高通量检测。该检测方法检测时间短、检测成本低、减少了人为因素的影响, 具有良好的应用前景。

Objective  A biosensor based on surface plasmon resonance (SPR)  principle was developed for food-borne pathogen bacteria detection, the method achieved  a high-throughput  detection for 11 kinds of bacteria. Methods  The chip surface was modified by self-assembled monolayer (SAM), and carboxyl group was introduced. The reaction of the carboxyl and amino leading to the probes were arrayed on the chips, and the biotin-avidin system was introduced to enhance the signal after hybridization. We evaluated the sensitivity, the specificity and other technical indicators by multiple PCR-SPR method. Results  The multiplex PCR-SPR method showed a good sensitivity. The sensitivity of 11 kinds pathogenic bacteria  reached 103~104 cfu/mL, which can meet the requirements of existing detection. Detection of 14 Standard strains and Salmonella strains were isolated from 90 samples. The results showed that the method had a good specificity without cross reaction. Conclusion  In this study, a detection method for 11 kinds of common foodborne pathogens was established by multiplex PCR-SPR system. It has a short detection time, a low detection cost, a reduction of the influence of manual factors, and will have a good application prospect.

标题：SPR生物传感器高通量检测多种食源性 致病菌的研究
英文标题：High-throughput detection for multiplexed food-borne pathogen using surface plasmon resonance biosensor

作者：
洪小柳 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
赵芳 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
刘慧玲 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
葛丽雅 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
丁晶 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
黄李华 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
马淑棉 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
吕敬章 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室
万志刚 深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室

中文关键词:表面等离子共振技术,生物芯片,高通量,食源性致病菌,
英文关键词:surface plasmon resonance technology,biochip,high throughput,foodborne pathogens,

发表日期：2014-10-13

2025-1-28 18:51 上传 SPR生物传感器高通量检测多种食源性 致病菌的研究.pdf

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