文档名：磁分离技术和纳米金比色法用于嗜碱性粒细胞活化试验研究
摘要：嗜碱性粒细胞活化试验是一种安全、高效的诊断过敏疾病技术,成为临床体外诊断过敏疾病的主要方法之一.目前,嗜碱性粒细胞活化试验主要是利用流式细胞术对细胞进行检测,这种方法通常存在检测时间长、操作繁琐和成本高等缺点.针对这些问题,本研究开发了一种表面修饰HLA-DR抗体的磁珠分离体系,将其与过敏患者的外周血共孵育5min后,利用磁性分离技术,筛选出表面含有HLA-DR标记物的细胞.测试结果表明,筛选后的嗜碱性粒细胞在全血中的细胞占比从0.2％提升到11.5％,嗜碱性粒细胞活化试验检测灵敏性得到了有效提高.进一步地,本研究构建了CD63适配体修饰的金纳米粒子检测体系,利用CD63适配体特异性识别活化后的嗜碱性粒细胞表面的CD63抗体,使金纳米粒子在嗜碱性粒细胞表面聚集,溶液颜色由红色转变为蓝紫色,实现对激活的嗜碱性粒细胞可视化比色检测,为临床开展嗜碱性粒细胞活化试验提供了新的方法.
Abstract：Basophilactivationtest(BAT)isasafeandefficienttechniqueforthediagnosisofallergicdiseases,whichisoneofthemainmethodsfortheclinicaldiagnosisofallergicdiseasesinvitro.FlowcytometryhasbeenmainlyusedinBAT.However,thismethodshowedsomedisadvantages,suchaslongdetectiontime,cumbersomeoperationandhighcost.Tosolvetheseproblems,wedevelopedamagneticbeadseparationsystemwithsurfacemodifiedHLA-DRantibody.Afterco-incubationwithperipheralbloodofallergicpatientsfor5min,cellswithHLA-DRmarkersonthesurfaceweresepratedbymagneticseparationtechnology.Theresultsshowedthattheproportionofbasophilcellsinwholebloodincreasedfrom0.2％to11.5％afterscreening,whicheffectivelyimprovedthesensitivityofBAT.Further,wedevelopedagoldnanoparticle-basedcolorimetrywiththeCD63aptamermodificationonthesurfaceofgoldnanoparticles.DuetothespecificityidentificationofCD63aptamerwithCD63antibodyafteractivationofbasophils,thegoldnanoparticlescangathertogetheronthesurfaceofbasophils,thusresultinginthecolorchangingfromredtoviolet,whichfinallyrealizedvisualcolorimetricdetectionoftheactivationofbasophils.WehereinbelieveourstrategywillprovideanewmethodforclinicalBAT.
作者：王迎迎 刘永欣 沈倩 付婵 余昌敏 Author：WANGYingying LIUYongxin SHENQian FUChan YUChangmin
作者单位：东南大学附属中大医院,南京210009南京工业大学柔性电子(未来技术)学院,南京210009
刊名：材料导报 ISTICEIPKU
Journal：MaterialsReports
年，卷(期)：2024, 38(9)
分类号：O633
关键词：比色法 金纳米粒子 嗜碱性粒细胞激活实验 磁分离 适配体
Keywords：colorimetry goldnanoparticles basophilactivationtest magneticseparation aptamer
机标分类号：O657.1X703.1TB383
在线出版日期：2024年6月28日
基金项目：磁分离技术和纳米金比色法用于嗜碱性粒细胞活化试验研究[
期刊论文] 材料导报--2024, 38(9)王迎迎 刘永欣 沈倩 付婵 余昌敏嗜碱性粒细胞活化试验是一种安全、高效的诊断过敏疾病技术,成为临床体外诊断过敏疾病的主要方法之一.目前,嗜碱性粒细胞活化试验主要是利用流式细胞术对细胞进行检测,这种方法通常存在检测时间长、操作繁琐和成本高等缺点...参考文献和引证文献
参考文献
引证文献
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