文档名：响应面法优化羟化酶催化酪醇合成羟基酪醇工艺
摘要：以pET-22b为载体,将基因HpaB、HpaC在E.coliBL21(DE3)中表达,得到高纯度的羟化酶HpaB、HpaC,并采用单因素实验和响应面法对羟化酶催化酪醇合成羟基酪醇的反应条件进行优化.确定最佳反应条件如下:温度为32℃、缓冲液为20mmol·L-1磷酸钾缓冲液(pH值7)、酪醇浓度为17.67mmol·L-1、HpaC加量为0.78mg·mL-1、NADH浓度为9.88mmol·L-1、FAD浓度为2.88μmol·L-1,在此条件下,酪醇转化率为99.99%,底物酪醇几乎完全转化为羟基酪醇.该研究为酶法催化合成羟基酪醇的工业化生产提供了理论基础.
Abstract：ThegenesHpaBandHpaCwereexpressedinE.coliBL21(DE3)byusingpET-22basacarri-er,andhydroxylaseHpaBandHpaCwithhigh-puritywereobtained.Moreover,weoptimizedthereactioncondi-tionsforthesynthesisofhydroxytyrosolfromtyrosolcatalyzedbyhydroxylasethroughsingle-factorexperi-mentsandresponsesurfacemethodologies.Theoptimalreactionconditionsaredeterminedasfollows:thetem-peratureis32℃,thebufferis20mmol·L-1potassiumphosphatebuffer(pHvalueof7),thetyrosolconcen-trationis17.67mmol·L-1,theHpaCdosageis0.78mg·mL-1,theNADHconcentrationis9.88mmol·L-1,andtheFADconcentrationis2.88μmol·L-1.Underaboveconditions,theconversionrateoftyrosolis99.99%,andthesubstratetyrosolisalmostcompletelytransformedintohydroxyltyrosol.Thestudyprovidesatheoreticalbasisfortheindustrialproductionofhydroxyltyrosolcatalyzedbyenzymaticmethod.
作者：刘英梅 郭新艳 张秀华 张小刚 刘飞 张艳艳 於怀龙 袁丹丹 孙晓康Author：LIUYingmei GUOXinyan ZHANGXiuhua ZHANGXiaogang LIUFei ZHANGYanyan YUHuailong YUANDandan SUNXiaokang
作者单位：山东省药学科学院山东省生物药物重点实验室山东省多糖类药物工程实验室多糖类药物发酵与精制国家地方联合工程实验室,山东济南250101
刊名：化学与生物工程 ISTICPKU
Journal：Chemistry&Bioengineering
年，卷(期)：2024, 41(7)
分类号：TQ243Q554
关键词：羟基酪醇 羟化酶 响应面法 酪醇转化率 生物合成
Keywords：hydroxytyrosol hydroxylase responsesurfacemethodology conversionrateoftyrosol biosyn-thesis
机标分类号：TS202.3X703R332
在线出版日期：2024年7月24日
基金项目：山东省重点研发计划(科技示范工程)项目，山东省重大科技创新工程项目，济南市新高校20条项目响应面法优化羟化酶催化酪醇合成羟基酪醇工艺[
期刊论文] 化学与生物工程--2024, 41(7)刘英梅 郭新艳 张秀华 张小刚 刘飞 张艳艳 於怀龙 袁丹丹 孙晓康以pET-22b为载体,将基因HpaB、HpaC在E.coliBL21(DE3)中表达,得到高纯度的羟化酶HpaB、HpaC,并采用单因素实验和响应面法对羟化酶催化酪醇合成羟基酪醇的反应条件进行优化.确定最佳反应条件如下:温度为32℃、缓冲液为20...参考文献和引证文献
参考文献
引证文献
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