酸辅助糖型简化法高效鉴定OGalNAc型糖基化修饰

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粘蛋白型O糖基化(O-GalNAcglycosylation)作为最重要的蛋白翻译后修饰种类之一,在诸如细胞粘附、信号传导和免疫应答等多种生命活动中都有参与1.异常的粘蛋白型O糖基化与肿瘤的生长和代谢有着紧密联系,所以对于异常的粘蛋白型O糖基化蛋白糖型的分析就很可能提高癌症临床诊断标志物筛选的特异性2-3.与N连接糖基化和O连接N-乙酰葡萄糖胺型糖(O-GlcNAc)基化相比,由于低丰度和复杂的糖型,粘蛋白型O糖基化的分析发展很少.本工作中，开发了一个结合亲水色谱富集和酸辅助去唾液酸的粘蛋白型O糖基化分析流程。在这个流程中，N糖基化糖链可以通过PNGaseF切除，排除N连接糖肽的对亲水色谱法的干扰，从而使得亲水性相对较弱的O糖基化肽段可以通过亲水色谱微柱捕集，实现通过亲水色谱法富集低丰度粘蛋白型O糖基化肽段的目的。之后通过与酸孵育可以切除90％以上的O糖链上的唾液酸残基，这样就可以简化糖链结构，同时增加O糖肽的离子化效率。运用该方法，通过直接搜索数据库的方式从牛胎球蛋白中鉴定到8个高可信的O糖基化位点。进一步，用此方法从人血清中鉴定到352个潜在O糖基化位点，这也是目前已知最大规模的人血清粘蛋白型糖基化位点数据集。
作者：由昕 秦洪强 毛家维 邹汉法 叶明亮
作者单位：中国科学院大连化学物理研究所,大连,116023;中国科学院大学,北京,100049中国科学院大连化学物理研究所,大连,116023
母体文献：第21届全国色谱学术报告会论文集
会议名称：第21届全国色谱学术报告会  
会议时间：2017年5月19日
会议地点：成都
主办单位：中国化学会
语种：chi
分类号：TV1TQ6
关键词：粘蛋白型O糖基化  亲水富集微柱  酸辅助去唾液酸  离子化效率
在线出版日期：2019年4月25日
基金项目：
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2024-12-1 20:59 上传 酸辅助糖型简化法高效鉴定OGalNAc型糖基化修饰.pdf

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