毛细管柱内的单细胞处理技术.pdf
基于液质联用策略的单细胞蛋白质组学分析技术目前还没有很好实现.这一技术的难点主要分为三部分,一是与液质系统相匹配的单细胞预处理技术,包括单细胞抓取,裂解,酶解;二是色谱分离;三是质谱检测.这三部分的技术难点目前为止都还没有得到很好的解决.为了解决第一部分技术难点,开发了一种毛细管柱内的单细胞处理技术.取一根空毛细管，在末端填入lcm反相填料。将单个细胞装入入口处的空管部分，并紧接着装入1cm长的酶解液(trypsin)。调节毛细管的柱后压力，使当流动相线速度仅为0.1mm/s时，柱压可达到200bar。使用液相色谱泵推动液体段至填料处。细胞会在巨大的系统压力下破裂，释放的蛋白质被填料捕集。紧接着酶解液会在填料处与细胞释放的蛋白混合。加热酶解。酶解得到的肽段也捕集在填料上。至此，单个细胞的处理步骤完成，得到的肽段可以洗脱至色谱柱进行分离。
作者：邵熙张祥民
作者单位：复旦大学化学系,上海,200433
母体文献：第21届全国色谱学术报告会论文集
会议名称：第21届全国色谱学术报告会
会议时间：2017年5月19日
会议地点：成都
主办单位：中国化学会
语种：chi
分类号：
关键词：蛋白质 液相色谱 质谱检测 单细胞预处理 毛细管柱
在线出版日期：2019年4月25日
基金项目：
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