低浓度臭氧暴露对酵母细胞中热休克蛋白HSP60和SSA1表达的影响

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目的：通过监测暴露于不同时间和浓度的臭氧中工程酵母细胞热休克蛋白HSP60、SSA1表达的变化情况,研究低浓度臭氧对酵母细胞的分子损伤和细胞应急修复机制.方法：将分别经荧光蛋白基因gfp修饰的hsp60、ssa1基因的两种工程酵母细胞(Y1,Y2)暴露于五种不同臭氧浓度8.0×10-5μg/mL、1.0×10-4μg/mL、1.6×10-4μg/mL、2.0×10-4μg/mL、3.0×10-4μg/mL,利用荧光分光光度仪测定不同暴露时间(20min、50min、80min、110min、140min)酵母细胞的荧光值.结果：当臭氧暴露浓度为3.0×10-4μg/mL,Y1细胞表达GFP-HSP60出现荧光强度峰值在20min,而Y2细胞GFP-SSA1荧光峰值则出现在80min.暴露于2.0×10-4μg/mL臭氧时,Y1、Y2细胞的荧光强度峰值分别在80min、110min出现.Y1、Y2细胞在1.6×10-4μg/mL、1.0×10-4μg/mL臭氧中的荧光强度峰值均出现在110min暴露时间;当臭氧浓度降低至8.0×10-5μg/mL时,Y1、Y2细胞荧光强度在140min内随时间增加不断升高.结论：本研究中采用的低浓度臭氧暴露对工程酵母细胞中HSP60、SSA1的表达均造成影响,细胞发生应激性反应;随暴露浓度升高,HSP60、SSA1生物标志物偶联的荧光蛋白强度与对照组相比均上升,且荧光强度到达峰值的时间随臭氧浓度而不同;同一浓度下,GFP-HSP60的荧光峰值早于GFP-SSA1,表明低浓度臭氧对酵母细胞线粒体损伤早于细胞核,热休克蛋白的表达量与臭氧暴露浓度呈现出时间累积效应.
作者：徐莉杨辉李天顺
作者单位：防化学院北京102205
母体文献：中国环境科学学会2021年科学技术年会论文集
会议名称：中国环境科学学会2021年科学技术年会  
会议时间：2021年10月1日
会议地点：天津
主办单位：中国环境科学学会
语种：chi
分类号：X83R65
关键词：臭氧污染  工程酵母  热休克蛋白  线粒体损伤  应急修复机制
在线出版日期：2022年1月20日
基金项目：
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2024-12-1 09:34 上传 低浓度臭氧暴露对酵母细胞中热休克蛋白HSP60和SSA1表达的影响.pdf

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