T_GZCX 020-2022 刺梨及其制品中总酚含量的测定

标准编号：T/GZCX020—2022
中文标题：刺梨及其制品中总酚含量的测定
英文标题：
国际标准分类号：67.080.10水果及其制品
中国标准分类号：
国民经济分类：A019其他农业
发布日期：2022年11月22日
实施日期：2022年12月01日
起草人：漆正方、孙宜春、钱品、陈杉、闫福泉、朱荣金、蔡志林、王鹏娇、龙久铃。
起草单位：国药集团贵州大健康产业发展有限公司、国药集团同济堂（贵州）制药有限公司、贵州初好农业科技开发有限公司、贵州金维宝生物技术有限公司、贵州天赐贵宝食品有限公司、贵州明安实业有限公司、中志浩刺梨产业开发(贵州)有限公司。
范围：本标准规定了刺梨及其制品中总酚含量测定的紫外分光光度法。本标准适用于刺梨鲜果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨冻干粉、刺梨喷干粉、刺梨原汁、刺梨浓缩汁等刺梨及其制品中总酚含量的测定。
主要技术内容：4方法原理在碱性条件下利用多酚的还原性，多酚可以将磷钨酸钼酸还原成蓝色，蓝色深浅与多酚含量成正相关，在760nm下测定吸光度值，外标法定量。5试剂5.1试剂除另有规定外，仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水。5.1.1没食子酸（C7H6O5，CAS：149-91-7）标准品：纯度≥98%。5.1.2无水乙醇（C2H6O）。5.1.3碳酸钠（Na2CO3）。5.1.4福林酚试剂（Folin-Phenol，BR，1mol/L）。5.2试剂配制5.2.1没食子酸对照品储备液（0.1mg/mL）：精密称取10mg（精确至0.1mg）没食子酸标准品，加入少量水溶解，转移至100mL棕色容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，4℃避光保存。5.2.2没食子酸标准系列浓度溶液：准确量取没食子酸对照品储备液（5.2.1）0.0mL、0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL、1.5mL于25mL棕色容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀，4℃保存。没食子酸标准系列浓度为0μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、3.0μg/mL、4.0μg/mL、5.0μg/mL、6.0μg/mL。现用现配。5.2.312%碳酸钠溶液：称取无水碳酸钠12g（精确至0.01g），加适量水溶解，转移至100mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀。5.2.480%乙醇提取剂：量取无水乙醇80mL，置100mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度。6仪器和设备6.1分光光度计。6.2高速破壁机。6.3超声波提取器。6.4高速冷冻离心机：转速10000rpm。6.5分析天平：感量0.0001g。6.6涡旋振荡器。6.7组织捣碎机。7分析步骤7.1试样制备将刺梨鲜果（3.1）刺梨鲜果去皮、去籽，组织捣碎机打浆，混合均匀，备用；去除刺梨果干（3.2）和刺梨果脯（3.3）中可见杂质，用高速破壁机粉碎，将其制成粉状，备用；刺梨冻干粉（3.4）和刺梨喷干粉（3.5）研磨均匀备用。7.2试样提取7.2.1固态试样：取7.1样品0.5~2g，精密称定（精确到0.0001g），置50mL具塞离心管内，加5mL水浸润样品，加80%乙醇溶液30mL超声处理90分钟，超声过程中振摇数次，保持固相完全分散。超声结束后离心（9000rmp、4℃）5分钟，滤过，用水洗涤沉淀物，合并洗液及滤液，加水定容至50mL容量瓶，即得。7.2.2液态试样：刺梨原汁（3.6）、刺梨浓缩汁（3.7）等液体样品，精密量取样品1~10mL，置50mL具塞离心管内，加80%乙醇溶液30mL超声处理90分钟。超声结束后离心（9000rmp、4℃）5分钟，滤过，用水洗涤沉淀物，合并洗液及滤液，加水定容至50mL容量瓶，即得。7.3标准工作曲线准确量取没食子酸标准系列浓度溶液（5.2.2）1.0mL于25mL刻度试管中，加1.0mol/LFolin-Phenol试剂1.0mL，摇匀后静置5分钟，再加入12%碳酸钠溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度线，30℃水浴加热90分钟，在760nm处测定吸光度。以25mL溶液中没食子酸质量（mg）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。7.4空白试验与试样的测定平行进行，取相同量的所有试剂，采用相同的分析步骤，但不添加试样。7.5试样的测定准确量取提取液（7.2）1mL，置于25mL刻度试管中，加入1.0mol/LFolin-Phenol试剂1.0mL，再加入12%的碳酸钠溶液（5.2.3）2.0mL，加水定容至刻度线，30℃水浴加热90分钟，在760nm处测定吸光度。若样品多酚含量较高（吸光度不在0.1~0.8之间），可适当稀释后再进行分析测定。8分析结果的表述8.1刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样试样中总酚含量（以没食子酸计）以百分含量（%）表示，按公式（1）进行计算。x=……………………（1）式中:x───试样中总酚含量（以没食子酸计）；m───由标准曲线查出的样品中没食子酸质量，单位为毫克（mg）；M───试样质量，单位为克（g）；d───样品稀释倍数；计算结果保留小数点后两位。8.2刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样样品中总酚含量（以没食子酸计）以百分含量（%）表示，按式（2）计算：x=……………………（2）式中:x───试样中总酚含量（以没食子酸计）；m───由标准曲线查出的样品中没食子酸质量，单位为毫克（mg）；v───试样体积，单位为毫升（mL）；d───样品稀释倍数；计算结果保留小数点后两位。9精密度在重复条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。

关键词：贵州省刺梨行业协会,T/GZCX,其他农业,刺梨,含量,及其制品

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