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[农、林、牧、渔业] T_GZCX 019-2022 刺梨及其制品中多糖含量的测定

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1 黄金阳光 发表于 2024-9-29 00:59 | 查看全部 阅读模式
标准编号:T/GZCX019—2022
中文标题:刺梨及其制品中多糖含量的测定
英文标题:
国际标准分类号:67.080.10水果及其制品
中国标准分类号:
国民经济分类:A019其他农业
发布日期:2022年11月22日
实施日期:2022年12月01日
起草人:漆正方、孙宜春、钱品、陈杉、闫福泉、朱荣金、蔡志林、王鹏娇、刘正芬。
起草单位:国药集团贵州大健康产业发展有限公司、国药集团同济堂(贵州)制药有限公司、贵州初好农业科技开发有限公司、贵州金维宝生物技术有限公司、贵州天赐贵宝食品有限公司、贵州明安实业有限公司、中志浩刺梨产业开发(贵州)有限公司。
范围:本标准规定了刺梨及其制品中多糖含量测定的紫外分光光度法。本标准适用于刺梨鲜果、刺梨干果、刺梨果脯、刺梨冻干粉、刺梨喷干粉、刺梨原汁、刺梨浓缩汁等刺梨及其制品中多糖含量的测定
主要技术内容:4方法原理多糖在浓硫酸的作用下,水解成单糖并迅速脱水生成糖醛衍生物,糖醛酸衍生物与苯酚反应生成橙黄色溶液,在490nm处有特征吸收。5试剂和材料5.1试剂除另有规定外,仅使用分析纯试剂和GB/T6682规定的一级水。5.1.1葡萄糖(C6H12O6,CAS号:50-99-7)标准品,纯度≥98.0%。使用前应于105℃恒温干燥至恒重。5.1.2硫酸(H2O4S),ρ=1.84g/mL。5.1.3无水乙醇(C2H6O)。5.1.4苯酚(C6H6O),重蒸馏。5.2试剂配制5.2.1葡萄糖对照品溶液(100mg/L):称取0.1g(精确至0.001g)葡萄糖标准品,置100mL烧杯中,加少量水溶解,转至1000mL棕色容量瓶中,加上定容至刻度,摇匀,置4℃冰箱中避光保存。5.2.280%乙醇溶液:量取无水乙醇80mL,置100mL容量瓶中,加水定容至刻度。5.2.380%苯酚溶液:称取苯酚80g(精确至0.01g),置100mL烧杯中,加水少量溶解,转移至100mL棕色容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀,置4℃冰箱中避光保存。5.2.45%苯酚溶液:量取5mL80%苯酚溶液(5.2.3),溶于75mL水中,混匀,现配现用。6仪器和设备6.1紫外分光光度计。6.2高速破壁机。6.3分析天平,感量为0.0001g。6.4超声波提取器。6.5涡旋振荡器。6.6离心机,4000r/min。6.7组织捣碎机。7分析步骤7.1试样制备将刺梨鲜果(3.1)刺梨鲜果去皮、去籽,组织捣碎机打浆,混合均匀,备用;去除刺梨果干(3.2)和刺梨果脯(3.3)中可见杂质,用高速破壁机粉碎,将其制成粉状,备用;刺梨冻干粉(3.4)和刺梨喷干粉(3.5)研磨均匀备用。7.2试样提取7.2.1固态试样:取7.1样品0.2~2g,精密称定(精确到0.0001g),置50mL具塞离心管内,用5mL水浸润样品,缓慢加入无水乙醇20mL,同时用涡旋振荡器振摇,使混合均匀,置超声波提取器中超声提取30分钟。提取结束后,离心10分钟,弃去上清液。沉淀用80%乙醇溶液10mL洗涤后离心5分钟,弃去洗涤液,用水将上述沉淀物转移入圆底烧瓶。加水50mL,置超声波提取器中超声处理30分钟,滤过,收集滤液;沉淀物再加水超声、滤过,重复2次。残渣洗涤2~3次,洗涤液合并滤液转至200mL容量瓶中,加水定容至刻度。此溶液为样品测定液(如颜色过深,可通过C18SPE小柱等进行脱色处理)。如样品多糖含量较高,可适当稀释后再进行分析测定。7.2.2液态试样:刺梨原汁(3.6)、刺梨浓缩汁(3.7)等液体样品,精密量取样品5~10mL,置50mL具塞离心管内,其余操作同7.2.1。7.3标准工作曲线准确量取葡萄糖对照品溶液(5.2.1)0.0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL分别置于20mL具塞试管中,用水补至1.0mL。加入5%苯酚溶液1.0mL(5.2.4),然后快速加入硫酸5.0mL(5.1.2)(与液面垂直加入,勿接触试管壁,以便与反应液充分混合,静置10分钟。使用旋涡振荡器使反应液充分混合,将试管放置于30℃水浴中反应20分钟,在490nm处测定吸光度。以葡萄糖质量浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。7.4空白试验与试样的测定平行进行,取相同量的所有试剂,采用相同的分析步骤,但不添加试样。7.5试样的测定准确量取试样提取液(7.2)适量,置于20mL具塞试管中,加入5%苯酚溶液1.0mL(5.2.4),然后快速加入硫酸5.0mL(5.1.2)(与液面垂直加入,勿接触试管壁,以便与反应液充分混合,静置10分钟。使用旋涡振荡器使反应液充分混合,将试管放置于30℃水浴中反应20分钟,在490nm处测定吸光度。若样品多糖含量较高(吸光度不在0.1~0.8之间),可适当稀释后再进行分析测定。8分析结果的表述8.1刺梨鲜果、刺梨干果等固态试样样品中多糖含量以质量分数x计,单位以克每百克(g/100g)表示,按式(1)计算:x=0.910-4……………………(1)式中:m1——从标准曲线上查得样品测定液中含糖量,单位为微克(μg);V1——样品定容体积,单位为毫升(mL);V2——比色测定时所移取样品测定液的体积,单位为毫升(mL);m2——样品质量,单位为克(g);0.9——葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。计算结果保留至小数点后两位。8.2刺梨原汁、刺梨浓缩汁等液态试样样品中多糖含量以质量分数x计,单位以克每百毫升(g/100mL)表示,按式(2)计算:x=0.910-4……………………(2)式中:m1——从标准曲线上查得样品测定液中含糖量,单位为微克(μg);V1——样品定容体积,单位为毫升(mL);V2——比色测定时所移取样品测定液的体积,单位为毫升(mL);V——样品体积,单位为毫升(mL);0.9——葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数。计算结果保留至小数点后两位。9精密度在重复条件下,获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。

关键词:贵州省刺梨行业协会,T/GZCX,其他农业,刺梨,多糖,含量

T_GZCX 019-2022 刺梨及其制品中多糖含量的测定.pdf
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